تفاصيل الوثيقة

نوع الوثيقة : رسالة جامعية 
عنوان الوثيقة :
الانتاج المطعم والخصائص الحركية لأنزيم ل-اسباراجينيز من جيوباسيلس DSM-465
RECOMBINANT PRODUCTION AND KINETIC PROPERTIES OF L-ASPARAGINASE FROM GEOBACILLUS DSM-465
 
الموضوع : كلية العلوم 
لغة الوثيقة : العربية 
المستخلص : الاسباراجينيز في المجالات الصناعية والدوائية على نطاق واسع. يعتبر إنزيم اسباراجينيز هو المسؤول عن تحويل اسبارجين إلى حمض الأسبارتيك والأمونيا في التفاعلات الغير عكسية. يتواجد انزيم اسباراجينيز بشكل واسع في الميكروبات والحيوانات والنباتات. ولقد استخدم إنزيم الاسباراجينيز ذا المصدر البكتيري بشكل كبير في معالجة سرطان الدم والاورام الليمفاوية في مرحلة الطفولة. ومع ذلك فان نشاط الجلوتومينز لهذا الإنزيم يسبب أعراض جانبية حقيقية أدت إلى البحث عن إنزيم ذا تخصصية عالية وأكثر استقرارية. في هذه الدراسة الجين المتكون من 972 شفره جينيه لـ 323 حمض أميني تم تكثيره عن طريق تقنية الـ PCR (تقنية تفاعل البلمرة المتسلسل) من بكتريا Geobacillus thermodenitrificans DSM 465 ثم باستخدام تقنية A/ Tللإستنساخ تم ربط وتكثير الجين في البلازميد PTZ57RT وتم إعادة تكثيره في البلازميد PET22b . إنزيم الاسباراجينيز المنتج عن طريق سلالة بكتيريا القولون شفرة RIL Escherichia coli BL21 (DE3) كبروتين خارجي عند 0.3 mM IPTG ودرجة حرارة 30° تم تنقيته عن طريق تقنية الكروموتوغرافي ذي التبادل الايوني باستخدام عمود الفصل المزود بمادة السفيدكس column. وقد ظهر الانزيم المنقى بوزن جزيئي قيمته حوالي 36 KDa عن طريق تقنية الهجرة الكهربائية لفصل البروتين SDS-PAGE. وأظهرت النتائج ان النشاط المتخصص لهذا الانزيم المنقى هو 1650 وحدة لكل مل جرام من البروتين مع نشاط جلوتومينيز 5% تقريبا. كما تبين أن أفضل نشاط لهذا الانزيم هو عند درجة حرارة 75° وعند اس هيدروجيني 9. كذلك ظهرت قيمة KM (ثابت ميكالس) لانزيم اسبارجينيز بمقدار 5.9 mM للاسبرجين. كما أظهرت النتائج الحاسوبية in slico أن هذا الإنزيم يوجد في صورة هوموتيترامير. تم انتاج هذا الانزيم ودرست خصائصه في هذه الدراسة التي تظهره كمرشح محتمل لمعالجة سرطان الدم. 
المشرف : د. محمد شاهد نديم 
نوع الرسالة : رسالة ماجستير 
سنة النشر : 1441 هـ
2019 م 
المشرف المشارك : د. مصطفى عدنان زيادي 
تاريخ الاضافة على الموقع : Wednesday, December 4, 2019 

الباحثون

اسم الباحث (عربي)اسم الباحث (انجليزي)نوع الباحثالمرتبة العلميةالبريد الالكتروني
حامد محمد السلميAlsulami, Hamed Mohammedباحثماجستير 

الملفات

اسم الملفالنوعالوصف
 45636.pdf pdf 

الرجوع إلى صفحة الأبحاث